بررسی در مورد تولید واکسن چندتایی تخلیص شده علیه بیماری های بی هوازی دامی شایع در ایران

طرح تحقیقاتی مربوطه به بررسی در مورد تهیه و تولید واکسن چندتایی تغلیظ شده علیه بیماریهای دامی شایع در ایران در این طرح تهیه یک واکسن آزمایشی تغلیظ شده برای مبارزه با بیماریهای آنتروتوکسمی گوسفند براکسی در گوسفند و شاربن علامتی در گوسفند و گاو مورد بررسی قرار گرفته است. روش تهیه واکسنها به شرح زیر خلاصه می گردد: - سویه های مورد استفاده در تهیه واکسنها برای تهیه واکسنهای مشروحه زیر از سویه های زهرابه زای- کلستریدیوم ولشی گونه های D،‭CB ‬کلستریدیوم سپتیکوم و کلستریدیوم نوویی استفاده گردیده است. - واکسن ضد آنتروتوکسمی تهیه شده با محیط های غذایی حاوی پپتون تامپون- دکسترین- گلوکز نمک های معدنی و ویتامین های مختلف - واکسن ضد قانقرایای عفونی کبد که با استفاده از پپتون- مالتوز سیستیین تهیه گردیده است. - واکسن ضد شاربن علامتی و براکسی نیز- از پپتون گلوکز- سیستیین برای تهیه آنها استفاده شده است. بتمام واکسنهای تهیه شده به نسبت ‮‭15‬ درصد ژل دالومین (بیست درصد) به عنوان یاور اضافه گردیده است. - تغلیظ واکسنها- حجم هر نوع شیشه واکسنرا با برداشت مایع شفاف فوقانی از ده لیتر به هفت لیتر تقلیل داده و سپس هر نوع واکسن را به نسبتهای مورد نیاز مخلوط می نماییم. - بیضرری و موثر بودن واکسن نمونه های جمع آوری شده از واکسن چندتایی به شش سر گوسفند تزریق و تا مدت دو هفته تحت نظر بوده اند که هیچگونه عوارض عمومی و موضعی مشاهده نگردید. نودول کوچکی در محل تزریق تولید که بتدریج جذب گردید. مخلوط نمونه های هر واکسن طبق استانداردهای بین المللی به تعداد دوازده سر خرگوش (‮‭3-6‬ ماهه) تزریق شده و مخلوط خون خرگوشها از نظر پادتن های بیتا واپسیلون کلستریدیوم ولشی و آلفا ادماسین عیار سنجی به عمل آمده است که در جدول شماره دو خلاصه گردیده است. جدول شماره 2- عیار پادتن ها در میلی لیتر سرم خون خرگوشها نوع واکسن بتا آنتی توکسین اپسیلون آنتی توکسین آلفا ادماسین آنتی توکسین واکسن چند تایی تغلیظ شده سی واحد بین المللی پنج واحد بین المللی هفت و نیم واحد بین المللی استاندارد بین المللی ‮‭1977‬ ‭British Vet. Codex ‬ده واحد بین المللی پنج واحد بین المللی سه و نیم واحد بین المللی همانطوریکه جدول فوق الذکر نشان می دهد عیار و پادتن ضد بیتا و آلفا ادماسین بالاتر از استاندارد بین المللی می باشد و عیار پادتن ضد اپسیلون برابر استاندارد بین المللی است. - آزمایش واکسن در فیلد- در دو گله گوسفند که بیماری قانقرایای عفونی در آنها شایع گردیده بود. اولی به تعداد دویست سر و دومی به تعداد شصت سر گوسفند با واکسن مخلوط به مقدار سه میلی لیتر زیر جلدی تزریق گردیدند. دامهای تزریق به مدت یک ماه زیر نظر قرار گرفتند که چند روز بعد از تزریق واکسن چندتایی بیماری بکلی قطع گردیده بود. کنترل آزمایشی واکسن در گله های مبتلا به آنتروتوکسمی و شاربن علامتی در سال آینده انجام خواهد گرید. طرح تحقیقاتی مربوط به یک واکسن چندتایی بر ضد شاربن آنتروتوکسمی قانقرایای عفونی کبد و براکسی گوسفند و بز برنامه پژوهشی طرح فوق الذکر طبق برنامه در سال گذشته انجام گردید ولی به علت تلف شدن یک راس از چهل راس گوسفند های واکسینه شده با سویه حاد شاربن با توجه به اهمیت طرح مجددا در سال ‮‭1364‬ با تغییراتی با همکاری بخش تحقیق و تهیه واکسنهای هوازی تکرار گردید و نتایج حاصله به شرح زیر می باشد: ابتدا واکسنهای چندتایی ضد قانقاریای عفونی کبد، شاربن، آنتروتوکسمی و براکسی تهیه و به منظور جلوگیری از اثر زیان بخش فرمل بر روی شاربن از متابی سولفیت سدیم پنجاه درصد به نسبت سه درصد حجم کل واکسن استفاده شد به واکسنهای تهیه شده در دو سری یکی به نسبت ده درصد ژل دالومین و دیگری به نسبت یک در هزار ساپونین به عنوان محرک اضافه شد. ابتدا برای ارزیابی پادتن های واکسن تهیه شده چندتایی تعداد چهل و هشت سر خرگوش (هر گروه واکسن در دز تزریقی 3 و 5 میلی لیتر دوازده سر) دو بار به فاصله یک ماه تزریق شدند و پس از دوازده هفته از تمام آنها خونگیری به عمل آمد و سرمهای مخلوط هر چهار گروه با استانداردهای بین المللی عیار سنجی و نتایج حاصله در جدول شماره 3 خلاصه می گردد. همانطوریکه جدول شماره 3 نشان می دهد و تمام عیار پادتن های حاصله در سرم خون خرگوشها از استانداردهای بین المللی بالاتر بوده و توانایی و قدرت یک واکسن چندتایی برای جلوگیری از بیماریهای ناشی از چند باکتری بیهوازی محرز می گردد. با توجه به نتایج حاصله واکسنهای تهیه شده به تعداد ‮‭42‬ سر گوسنفد و ‮‭13‬ سر بز تزریق گردیده لازم به ذکر است که این دامها قبلا بر ضد هیچگونه بیماری واکسینه نگردیده بودند. دو تزریق از واکسنهای چهارگانه 3 و 5 میلی لیتر با یاور ژل دالومین و ‮‭3000‬ و 5 میلی لیتر واکسن دارای یاور ساپونین به تعداد ‮‭42‬ سر گوسفند و ‮‭13‬ سر بز با دو تزریق به فاصله ‮‭21‬ روز انجام گردید. خونگیری از دامهای واکسینه یکی قبل از تزریق واکسن و دیگری دو هفته بعد از تزریق اول و سومی دو هفته بعد از تزریق دوم به عمل آمد. که عیار سنجی سرمها در جریان می باشد. به تمام دامهای واکسینه شده و دو سر گوسفند و یک سر بز که شاهد بوده اند سه هفته بعد از تزریق اول واکسن چندتایی سویه حاد باکتری آنتراسیس بر طبق استاندارد بین المللی ‭(British vet. Codex ) ‬تزریق شد که تمام دامهای واکسینه مقاومت نموده ولی سه راس گوسفند و بز که شاهد بودند از بیماری شاربن تلف گردیدند. در این آزمایش ثابت گردید که دامهای تزریق شده با واکسن چندتایی در مقابل بیماری شاربن کاملا مقاوم می باشند. ادامه آزمایشهای مربوط به این طرح از نظر عیار سنجی سرم گوسفند ها و همچنین آزمایش مستقیم این واکسن در گله های آلوده به بیماریهای شاربن و کلستردیدیوم ها در سال آینده انجام خواهد گردید. به منظور بررسی واکسن مزبور و عیار سنجی های مختلف مربوط به آن تا کنون ‮‭55‬ سر گوسفند و بز ‮‭48‬ سر خرگوش و ‮‭164‬ سر موش سفید تزریق شده اند. جدول شماره 3- واحد پادتن های مختلف