همسانهسازی ژن پیروات دکربوکسیلاز موثر در تولید بیواتانول در باکتری اشرشیا کلای
Publish place: Biological Journal of Microorganisms، Vol: 5، Issue: 18
Publish Year: 1395
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 553
This Paper With 19 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- I'm the author of the paper
Export:
Document National Code:
JR_BJM-5-18_002
Index date: 1 May 2021
همسانهسازی ژن پیروات دکربوکسیلاز موثر در تولید بیواتانول در باکتری اشرشیا کلای abstract
مقدمه: اتانول ساختهشده از زیستتوده یکی از راهبردهای بینظیر و سودمند از لحاظ اقتصادی و محیطی است و میتواند بهعنوان یک سوخت پاک و ایمن، جایگزین سوختهای فسیلی شود. مواد و روش ها: در این پژوهش کلیدیترین آنزیم موثر در مسیر تولید اتانول زیستی (پیروات دکربوکسیلاز) از زایموموناس موبیلیس انتخاب و در اشرشیا کلای بهروش ذوب-انجماد همسانهسازی شد. برای همسانهسازی ژن مدنظر از آغازگرهای اختصاصی ژن پیروات دکربوکسیلاز و واکنش پیسیآر استفاده شد. سپس ژن پیروات دکربوکسیلاز و پلاسمید pET ۲۸a را آنزیمهای محدودکننده Sal I و Xho I برش دادند؛ محصولاتی که آنزیم لیگاز برش دادند در دمای ۱۶ درجه سانتیگراد و در مدت ۱۶ ساعت به همدیگر متصل شدند. نتایج: کشت باکتریها در محیط کشت LB انتخابی نشان داد که تنها کلونیهای حاوی پلاسمید pET ۲۸a قادر به رشد هستند. نتایج کلونی پیسیآر با آغازگرهای اختصاصی باندهایی در اندازه تقریبی ۱۷۰۰ جفت باز را نشان داد. نتایج مربوط به پیسیآر پلاسمیدهای نوترکیب توسط آغازگر رفت راهانداز T۷ و آغازگر برگشت ژن پیروات دکربوکسیلاز، جهت صحیح درج ژن در داخل پلاسمید را ثابت کرد و باندی بهاندازه ۱۸۸۵ جفت باز را نشان داد و نتایج هضم آنزیمی پلاسمیدpET ۲۸a pdc نوترکیب توسط آنزیمهای Sal I و Xho I باندهای مشابهی را آشکار کرد. درنهایت واکنش RT باند مورد انتظار ۱۷۰۰ جفت باز را نشان داد که حاکی از بیان ژن مورد نظر در این نمونهها بود. بحث و نتیجه گیری: از مهمترین مشکلات در بیوسنتز اتانول، محدودیت عملکرد آنزیمهای درگیر در مسیر بیوسنتز اتانول از مواد اولیه نظیر ضایعات کشاورزی است؛ این آنزیمها در تبدیل مواد اولیه پلیمری به مواد اولیه با ساختار ساده و قابل تخمیر نقش اساسی دارند. به نظر میرسد افزایش بیان ژن پیروات دکربوکسیلاز تحت کنترل پروموتور قوی T۷ منجر به افزایش تولید محصول نهایی خواهد شد.
همسانهسازی ژن پیروات دکربوکسیلاز موثر در تولید بیواتانول در باکتری اشرشیا کلای Keywords:
همسانهسازی ژن پیروات دکربوکسیلاز موثر در تولید بیواتانول در باکتری اشرشیا کلای authors
معصومه زینالی
کارشناس ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل، ایران
بهمن حسینی
دانشیار بیوتکنولوژی گیاهی، دانشگاه ارومیه، ایران
سدابه جهانبخش
دانشیار اصلاح نباتات ، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل، ایران
محمود رضا زاد باری
دانشیار صنایع غذایی، دانشگاه ارومیه، ایران
میثم طباطبایی
استادیار بیوتکنولوژی میکروبی، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی کرج، ایران
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :