انتقال و بیان ژن GnRH نوترکیب ماهی در باکتری  BL۲۱ E. coli به منظور تولید هورمون نوترکیب

صدیقه محمدزاده; سکینه یگانه; فاطمه مرادیان; بهرام فلاحتکار; سلواین میلا

انتقال و بیان ژن GnRH نوترکیب ماهی در باکتری BL۲۱ E. coli به منظور تولید هورمون نوترکیب

Publish place: Iranian Scientific Fisheries Journal، Vol: 28، Issue: 3

Publish Year: 1398

Type: Journal paper

Language: Persian

This Paper With 12 Page And PDF Format Ready To Download

DOWNLOAD Paper

Certificate
I'm the author of the paper

این Paper در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:

کشاورزی > پرورش آبزیان

Export:

Link to this Paper:

https://civilica.com/doc/1310834

Document National Code:

JR_ISFJ-28-3_013

Index date: 11 November 2021

انتقال و بیان ژن GnRH نوترکیب ماهی در باکتری BL۲۱ E. coli به منظور تولید هورمون نوترکیب abstract

هورمون آزاد کننده گنادوتروپین (GnRH) یک نوروپپتید موثر در تنظیم فرآیند تولیدمثل در مهره داران می باشد. آنالوگ های مختلفی از این هورمون به فرم سنتتیک با نیمه عمرهای مختلف برای تکثیر مصنوعی آبزیان در بازار موجود می باشند. هدف از این تحقیق بررسی بیان GnRH نوترکیب در باکتری Escherichia coliسویه BL۲۱به منظور تولید هورمون نوترکیب می باشد. در این تحقیق، توالی DNA مربوط به پپتید GnRH طراحی شده در وکتور بیانی pET۲۸a+ کلون شد. واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) به کمک آغازگرهای اختصاصی صحت کلونینگ را نشان داد. وکتور نوترکیب pET۲۸a+/GnRH به باکتری بیانی E. coli BL۲۱ (DE۳) انتقال داده شد و صحت انتقال با کلونی PCR سنجیده شد و باند ۱۸۶ جفت بازی حاصل از تکثیر ژن بر ژل آگارز مشاهده گردید. سپس برای بررسی بیان، باکتری نوترکیب در محیط Luria Bertani (LB) حاوی آنتی بیوتیک کانامایسین در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد کشت داده شد و با غلظت یک میلی مولار Isopropyl β-D-۱-thiogalactopyranpside (IPTG) القاء شد و بعد از القاء، باکتری در دو دما و زمان مختلف شامل ۶ ساعت در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد و ۲۴ ساعت در دمای ۲۰ درجه سانتی گراد قرار گرفت. میزان بیان به کمک الکتروفورز ژل SDS-PAGE تعیین شد. بررسی SDS-PAGE نشان دهنده بیان پپتید بوده و باند هشت کیلودالتونی مربوط به پپتید مورد نظر بر روی ژل قابل مشاهده بود. همچنین میزان بیان پپتید در دمای ۲۰ درجه سانتی گراد بیشتر از دمای ۳۷ درجه سانتی گراد می باشد. با توجه به نتایج بدست آمده از تحقیق حاضر می توان نتیجه گرفت که هورمون GnRH قابلیت تولید در سیستم بیانی پروکاریوتی همانند اشریشیاکلی را دارد و پس از خالص سازی می تواند به عنوان یک همولوگ خاص برای درمان اختلالات تولید مثلی در آبزیان معرفی گردد.

انتقال و بیان ژن GnRH نوترکیب ماهی در باکتری BL۲۱ E. coli به منظور تولید هورمون نوترکیب Keywords:

GnRH , E.coli , Aquatic animals , Hormonal induction , GnRH , اشرشیاکلی , القای هورمونی , آبزیان

انتقال و بیان ژن GnRH نوترکیب ماهی در باکتری BL۲۱ E. coli به منظور تولید هورمون نوترکیب authors

صدیقه محمدزاده

Sari Agricultural Sciences and Natural Resources University

سکینه یگانه

Fisheries Department, Faculty of Animal Sciences and Fisheries, Sari Agricultural Sciences and Natural Resources University, Sari, Iran

فاطمه مرادیان

دانشکده علوم دام و شیلات دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری

بهرام فلاحتکار

دانشگاه گیلان

سلواین میلا

دانشگاه لورین

مراجع و منابع این Paper:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :

سوداگر، م.، صدق پورثابت، س.، ذکریائی، ح. و دادگر، ...

کلباسی، م.ر.، لرستانی، ر. و غفله مرمضی، ج.، ۱۳۹۱. تاثیر ...

محمدی، ن.، کریمی، ج.، شباب، ن.، نادری، س.، یادگارآذری، ر. ...

Aizen, J., Meiria, I., Tzchoria, I., Levavi-Sivan, B. and Rosenfeld, ...

Falahatkar, B., Poursaeid, S., Langroudi, H.E., Efatpanah, I., Meknatkhah, B. ...

German, L.R. and Eduaedo, A.C., ۲۰۱۴. Recombinant protein expression in ...

Hayat, S.M., Farahani, N., Golichenari, B. and Sahebkar, A., ۲۰۱۸. ...

Jagdish, C., Rohit, S., Sahai, P. and Talwar, G.P., ۲۰۱۷. ...

Laemmli, U.K., ۱۹۷۰. Cleavage of structural proteins during the assembly ...

Li Y., ۲۰۱۱. Recombinant production of antimicrobial peptides in Escherichia ...

Okubo, K. and Nagahama, Y., ۲۰۰۸. Structural and functional evolution ...

Qing, G., Ma, L.C., Khorshid, A., Swapna, G., Mal, T.K., ...

Raina, K., Panda, A.K., Ali, M.M. and Talwara, G.P., ۲۰۰۴. ...

Rodriguez-Carmona, E., Cano-Garrido, O., Seras-Franzoso, J., Villaverde, A. and Garcia-Fruitos, ...

Rosano, G.L. and Ceccarelli, E.A., ۲۰۱۴. Recombinant protein expression in ...

Shiloach, J. and Fass, R., ۲۰۰۵. Growing E. coli to ...

Xu, J., Zhu, Z., Duan, P., Li, W., Zhang, Y., ...

Zemora, N., Gonzalea, M.D., Munoz, J.A., Madigou, T., Sanchez, E., ...

Zohar, Y. and Mylonas ,C.C., ۲۰۰۱. Endocrine manipulations of spawning ...

نمایش کامل مراجع