همسانه سازی پروموتر اختصاصی GBSS به همراه ناحیه ی سیگنال پپتید رقم مارفونا در سیب زمینی

یکی از راههای تولید گیاهان تراریخته استفاده از راه انداز های متنوعی است که در گیاهان وجود دارد.راه انداز برای رونویسی یک ژن ضروری است و کنترل بیان ژنها بطور عمده در سطح رونویسی انجام می شود و نقش اولیه در این تنظیم مربوط به منطقه ی پروموتر ی ژن می باشد. به خاطر مشکلات پروموترهای عمومی از جمله بیان ترانسژن مورد نظر به مقدار نامناسب و در زمان و بافت نادرست از گیاه پروموترهای اختصاصی بافتی رواج یافته اند. به دلیل اهمیت سیب زمینی بعد از گندم ذرت و برنج، جداسازی و همسانه سازی پروموتر اختصاصی gbss هدف اصلی این تحقیق می باشد همچنین وجود توالی پپتید نشانه موجب انتقال پروتئین نوترکیب به بافت یا اندام مورد نظر می شود. در این کار ابتدا پرایمرهای اختصاصی برای نواحی مورد نظر از راه انداز و ناحیه ی سیگنال پپتید طراحی و برای تولید سفارش داده شدند. و برای تکثیر قطعه ی مورد نظر به اندازه ی 1040 نوکلئوتید پس از استخراج DNA واکنش PCR انجام گرفت سپس، این قطعات در پلاسمید همسانه سازی شدند و عمل ترانسفورماسیون به داخل باکتریcoli E.انجام گرفت سپس پلاسمیدهای استخراج شده از آنها از طریق آنزیم های برشی، مورد تایید قرار گرفتند و توالی های حاصله مجددا مورد بررسی های بیوانفورماتیکی قرارگرفت و شباهت قطعه ی مورد نظر با توالی موجود در NCBI تایید شد.

Keywords:

غده ی سیب زمینی , پروموتر اختصاصی , GBSS , پپتید نشانه