ورود
مقالات فارسیISIکنفرانسهاژورنالها

ساخت سازه ژنی pCDNA۳.۱-AopB به عنوان مدل واکسن DNA علیه Aeromonas hydrophila در کپورماهیان

Publish place: Journal of Aquatic Animal Physiology and Biotechnology، Vol: 10، Issue: 4
Publish Year: 1401
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 27

This Paper With 20 Page And PDF Format Ready To Download

  • Certificate
  • من نویسنده این مقاله هستم

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این Paper:
https://civilica.com/doc/1932136

شناسه ملی سند علمی:

JR_JAPB-10-4_002

تاریخ نمایه سازی: 16 اسفند 1402

Abstract:

باکتری Aeromonas hydrophila یکی از مهم ترین باکتری­های بیماری زای ماهی است که سبب سپتی سمی هموراژیک، آب آوردگی محوطه شکمی و مرگ و میر در سنین متفاوت و در گونه­های مختلف ماهی به ویژه کپورماهیان می­شود. ایمن سازی یکی از روش­های مناسب برای پیشگیری از این بیماری است. استفاده از سازه های ژنی حاوی آنتی ژن های اختصاصی باکتری ها در سال­های اخیر به منظور توسعه واکسن هایی با کارایی بالا و استفاده در روش های آسان تر مانند تجویز خوراکی در آبزی پروری توسعه یافته است. در مطالعه حاضر، پروتئین aopB سیستم ترشحی تیپ III باکتری A. hydrophila جدا شده از کپورماهیان استان خوزستان به منظور طراحی یک سازه ژنی مدل واکسن DNA در پلاسمید یوکاریوتی بیانی pCDNA۳.۱ همسانه سازی شد. در این پژوهش از جدایه­ باکتری A. hydrophila که از ماهیان کپور مبتلا به سپتی­سمی آئروموناسی در مزارع پرورشی استان خوزستان جداسازی و با روش مولکولی و فنوتیپی تایید شده بودند، استفاده شد. توالی ژن aopB از بانک ژن NCBI استخراج و ناحیه کد کننده ژن با استفاده از آغازگرهای حاوی نواحی برش آنزیم­های EcoRI و NheI تکثیر شد. سپس محصول PCR در پلاسمید بیانی یوکاریوتی pCDNA۳.۱-HisA الحاق و با استفاده از شوک حرارتی به باکتری TOP۱۰-F' انتقال داده شد. پس از غربالگری کلون­های مثبت با استفاده از کلونی PCR و تعیین توالی، سازه ژنی pCDNA۳.۱-AopB با استفاده از روش الکتروپوراسیون به سلول­های CHO منتقل و بیان پروتئین نوترکیب با استفاده از روش وسترن بلات در لیز سلولی ارزیابی شد. نتایج PCR و تعیین توالی سازه ژنی نشان دهنده همسانه سازی ژن aopB به طول تقریبی ۱۰۰۰ جفت باز در پلاسمید pCDNA۳.۱-HisA بود. آزمون وسترن بلات با استفاده از آنتی بادی ضد HisTag وجود یک پروتئین با وزن مولکولی حدود ۳۶ کیلودالتون را نشان داد. در مجموع، سازه ژنی pCDNA۳.۱-AopB حاوی ژن aopB طراحی و مورد تایید قرار گرفت. از این سازه ژنی می توان در مطالعات بالینی به منظور بررسی ایمنی زایی در کپورماهیان در بیماری زایی تجربی با A. hydrophila استفاده کرد.

Keywords:

Authors

مرضیه واثقی

Ph.D. in Aquatic Animal Health, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran

مجتبی علیشاهی

Professor in Department of Livestock, Avian and Aquatic Animal Health, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran

محمدرضا تابنده

Associate Professor in Department of Basic Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran

مسعود قربانپور

Professor in Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran

محمد خسروی

Associate Professor in Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran

مراجع و منابع این Paper:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :
  • آهنگرزاده م.، قربانپور نجف آبادی م.، پیغان ر.، شریف روحانی ...
  • علیشاهی م.، سلطانی م.دو زرگر ا. ۱۳۸۸. بررسی باکتریایی تلفات ...
  • Abdelhamed H., Banes M., Karsi A. and Lawrence M.L. ۲۰۱۹. ...
  • Bulir D.C., Liang S., Lee A., Chong S., Simms E., ...
  • Carvalho-Castro G.A., Lopes C.O., Leal C.A.G., Cardoso P.G., Leite R.C. ...
  • El-Bahar H.M., Ali N.G., Aboyadak I.M., Khalil S.A.E.S. and Ibrahim ...
  • Ellis A.E. ۱۹۸۸. Fish Vaccination. Academic Press, USA. ۲۵۵P ...
  • Fasciano A.C., Shaban L. and Mecsas J. ۲۰۱۹. Promises and ...
  • Gao Y., Pei C., Sun X., Zhang C., Li L. ...
  • Han B., Xu K., Liu Z., Ge W., Shao S., ...
  • Inthasaeng P., Unajak S., Areechon N., Hirono I. and Surachetpong ...
  • Jordan M., Schallhorn A. and Wurm F.M. ۱۹۹۶. Transfecting mammalian ...
  • Koroleva E.A., Kobets N.V., Shcherbinin D.N., Zigangirova N.A., Shmarov M.M., ...
  • Li J.N., Zhao Y.T., Cao S.L., Wang H. and Zhang ...
  • Li L., Lin S.L., Deng L. and Liu Z.G. ۲۰۱۳. ...
  • Martinez-Becerra F. J., Kissmann J.M., Diaz-McNair J., Choudhari S.P., Quick ...
  • Mzula A., Wambura P.N., Mdegela R.H. and Shirima G.M. ۲۰۱۹. ...
  • Pessoa R.B.G., De Oliveira W.F., Marques D.S.C., Dos Santos Correia ...
  • Rasmussen-Ivey C.R., Figueras M.J., McGarey D. and Liles M.R. ۲۰۱۶a. ...
  • Rasmussen-Ivey C.R., Hossain M.J., Odom S.E., Terhune J.S., Hemstreet W.G., ...
  • Shefat S.H.T. ۲۰۱۸. Vaccines for use in finfish aquaculture. Acta ...
  • Song M.F., Kang Y.H., Zhang D.X., Chen L., Bi J.F., ...
  • Thirumalaikumar E., Lelin C., Sathishkumar R., Vimal S., Anand S.B., ...
  • Van Sang N. and Uyen N.T. ۲۰۲۱. Cloning, expression, purification, ...
  • Vilches S., Jimenez N., Tomas J.M. and Merino S. ۲۰۰۹. ...
  • Xiong X.M., Chen Y.L., Liu L.F., Wang W.M., Robinson N.A. ...
  • Zellweger R.M., Carrique-Mas J., Limmathurotsakul D., Day N.P.J., Thwaites G.E. ...
    • نمایش کامل مراجع