بهترین تیمار زمانی کلشی سین برای تولید لاین دابل هاپوئید خربزه

هاپلوئید ها و دابل هاپلوئید ها می توانند به طور موثری سرعت برنامه های اصلاحی محصولات باغبانی را بویزه در نقشه یابی ژنومی و بدست اوردن اطلاعات قابل اطمینان برای مکان بابی ژن های اصلی و QTL ها برای صفات مهم اقتصادی افزایش دهند. گیاهان هاپلوئید خربزه حاصل از طریق القاء جنین های پارتوژنیک برای تولید گیاهان دابل هاپلوئید توسط کلشی سین در ابتدا کولشیسین دا در دی متیل سولفوکساید DMSO در 10 میلی گرم در لیتر آب مقطر رقیق کرده و ان را با غلظت 500 میلی گرم در لیتر د محیط مایع E20A و اب مقطر استریل فیلر می کنیم زیرنمونه هایی به اندازه 1.5 تا 3 که هرکدام دارای یک تا دو گره بودند از گیاهچه های هاپلوئید تهیه و در معرض تیمارهای مختلف کولشیسین قرار گرفتند. سه تیمار زمانی 12 ساعت ، 18 ساعت و 24 ساعت در محلول ppm 500 کولشیسین برای باززایی گیاهان دابلدهاپلوئید صورت گرفت که طی آن ریز نمونه های هر رقم جداگانه در شیشه های حاوی محلول کلشیسین ریخته و بروی دستگاه شیکر با 100 دور در دقیق قرار می گرفتند. بعد از پایان هر تیمار نمونه ها زیر لامینار ایفلو 3 مرتبه با اب مقطر استریل شستشو و بعد طی دو ازمایش مختلف به محیط کشت معمولی منتقل شدند. از میان تیمارهای مختلف کولشیسین نرخ زنده مانی ریزنمونه های مورد آزمایش که به مدت زمان 12 ساعت تیمار شدند به طور معنی داری بیشترین میزان زنده مانی 84% و موارد میان گره ای به مدت 24 ساعت کمترین میزان باززایی 20% زا نشان دادند.

Keywords:

خربزه , هاپلوئید , دابل هاپلوئید , کلشی سین