بهینه سازی انتقال ژن به کالوس جنین زای نیشکر (Nco310) به روش بمباران ذره ای

جهت انتقال ژن به گیاه نیشکر (Sugarcane) واریته مهم تجاری، Nco310 به روش بمباران ذره ای پارامترهای فیزیکی و بیولوژیکی مورد بررسی قرار گرفت. اثر پارامترهای مختلف مانند فاصله ذرات پرتاب شونده از بافت هدف، نوع ذره، تعدد بمباران، غلظت DNA و نوع محیط اسموتیک روی بیان موقت ژن GUS مورد ارزیابی قرار گرفتند. بدین منظور کالوس جنین زای حصل از کشت ریز نمونه ساقه نیشکر Nco310 توسط ناقل های حاوی ژن GUS تحت کنترل پروموترهای CaMv 35S, ActI و Ubi بمباران شده است. تعداد لکه های ابی ظاهر شده پس از رنگ آمیزی با ماده X-gluc مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج حاصل نشان داد که شرایط بهینه بیان ژن GUS در کالوس جنین زای نیشکر عبارتند از : پروموتر Act1، بمباران با ذرات طلا یک میکرومتر پوشاننده شده با 12.5 میکروگرم NDA و با فشار 9cm, 1100 psi فاصله ذرات پرتاب شونده از بافت هدف و در محیط اسموتیک 0/2 M مانیتول و 0/2 M سوربیتول. شرایط بهینه فوق الذکر برای اولین بار در گیاه نیشکر واریته Nco310 در ایران گزارش می شود.

Keywords:

نیشکر , بمباران ذره ای , کالوس جنین زا , بیان موقت