بررسی امکان تولید آنزیمهای سلولاز و گلوکاناز با استفاده از پسماندهای لیگنوسلولزی محصولات کشاورزی

آنزیم ها گستره ی وسیعی از کاربرد در بیوتکنولوژی، صنایع غذایی، تغذیه ی دام و طیور، نساجی، کاغذ سازی، داروسازی و تولید سوخت بیولوزیک و ... دارند. قارچ Trichoderma spp. یکی از ارگانیسم های مهم تولید کننده دامنه بسیار وسیعی از انواع آنزیم های سلولیتیک در طبیعت است. در این پژوهش از سلولز کلوئیدی در محیط تخمیر قارچ تریکودرما استفاده گردید و با استفاده از گونه های مختلف قارچ تریکودرما (Trichoderma viride, T. harzianum, T. reesei) آنزیم سلولاز در شرایط دمایی °C 28 و سرعت همزدن rpm 180برای مدت 48 ساعت تولید گردید. فعالیت آنزیم BCase دارای مقادیر بالاتری نسبت به Avicelase و FPase بود که نشانه قابلیت دسترسی بالای آن برای آنزیم بود. بالاترین میزان تولید پروتئین خارج سلولی در قارچ T. viride مشاهده شد. بالاترین فعالیت CMCase در مایع فوقانی محیط تخمیر T. reesei مشاهده شد. فعالیت آویسلاز در قارچ های مورد آزمون در مایع فوقانی محیط تخمیر T. viride مشاهده شد. بالاترین فعالیت FPase (سلولاز کل) نیز در قارچ T. harzianum مشاهده گردید. سلولاز کل شامل فعالیت آنزیم های اندوگلوکاناز، اگزوگلوکاناز و بتا-گلوکوزیداز می شود که بصورت سینرژیستی باعث هیدرولیز سلولز کریستالی می شوند. کلیه نمونه ها دارای بندهای پروتئینی متعدد در پروفایل پروتئینی SDS-PAGE بودند. قارچ های T. harzianum و T. reesei دارای هر دو باند آنزیمی Cel6A (CBHII) و Cel7A (CBHI) بودند، اما T. viride تنها دارای باند آنزیمی قوی Cel7A بود. آنزیم Cel12A (EGIII) تنها در T. reesei مشاهده شد. بالاترین سینرژی در فعالیت FPase و BCase قارچ T. harzianum مشاهده شد که حاوی مقادیر زیادی از CBH I و CBH II و مقادیر اندکی از EG بود. همچنین Cel 3A (BGL I) و Cel 1A (BGL II) به ترتیب در پروفایل T. reesei و T. harzianum مشاهده شد. بالا بودن مقادیر فعالیت BCase و FPase در T. harzianum و T. reesei به علت حضور آنزیم های CBH و EG و سینرژی رخ داده بین CBH و EG می باشد. نتایج این تحقیق می تواند در رابطه با هیدرولیز پسماند های لیگنوسلولزی کاربرد داشته باشد.

Keywords:

تریکودرما , سلولاز , پروفایل پروتئین , سینرژیسم , الکتروفورز