تولید پروتئین نوترکیب پکتات لیاز Coh01152 از باکتری Cohnella A01
Publish place: The first electronic congress of new findings in the environment and agricultural ecosystems
Publish Year: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 1,127
This Paper With 7 Page And PDF and WORD Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
AGROCONGRESS01_319
تاریخ نمایه سازی: 16 خرداد 1394
Abstract:
پکتات لیاز، آنزیمی است که موجب برش حذفی اتصالات گلیکوزیدی در پلی گالاکتورونیک اسید و تولید الیگوگالاکتورونات-های اشباع نشده می شود. پکتات لیازهای قلیایی، دارای کاربرد گسترده ای در فرآوری الیاف گیاهی و منسوجات هستند. تاکنون ژن این آنزیم از گونههای مختلفی از میکرو ارگانیسم ها استخراج و همسانه سازی شده است. در این پژوهش پس از استخراج DNA ژنومی از باکتری کوهنلا و طراحی پرایمر، قطعهی ژنی به طول bp 1200 جدا شد و در وکتور pTZ57R/T کلون گردید. هضم آنزیمی دو وکتور pTZ57R/T وpET26b توسط آنزیمهای برشی Nco I وXho I انجام و واکنش لیگاسیون بین قطعه ی ژنی تخلیص شده و وکتور pET26b صورت گرفت و محصول الحاق در میزبان بیانی E.coli BL21(DE3) ترانسفورم گردید. جهت تولید پروتئین نوترکیب پس از اطمینان از انجام لیگاسیون با استفاده از PCR، هضم آنزیمی و تعیین توالی، بیان با القاء IPTG (M1/0) در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 6 ساعت صورت گرفت. مشاهدهی باند حاصل از تولید پروتئین در KDa 41 تاییدی دیگر بر صحت کلونسازی و فعالیت پروموتر میباشد.
Keywords:
Authors
شقایق افراز
بخش صنعت و محیط زیست، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری گروه پژوهشی بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه شاهرود
سعید امین زاده
بخش صنعت و محیط زیست، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
ناصر فرخی
گروه پژوهشی بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه شاهرودگروه زراعت و اصلاح نباتات، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شاهرود
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :