تولید Lgy برمبنای DNA در طیور، پلی جدید بین ژنومیکس و پروتئومیکس
Publish place: 8th national biotechnology congress of I.R. Iran & 4th National Conference on biosecurity
Publish Year: 1392
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 648
This Paper With 5 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
این Paper در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI08_0083
تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394
Abstract:
آنتیبادی Lgy برمبنای DNA، به تولید آنتیبادی Lgy بوسیله ایمن کردن ژنتیکی طیور گفته میشود. در این مطالعه از پروتئین انترفرن گامای نوترکیب (rBoIFN-y) و پروتئین شوک حرارتی 70 نوترکیب (rHSP70) باکتری مایکوباکتریوم آویوم به عنوان مدل ی پروتئینی ، یوکاریوتی و پروکاریوتی، برای تولید آنتیبادی در مرغ مورد استفاده قرار گرفت. ژن های مربوطه بعد از همسانه سازی به پلاسمید بیانی (+) pcDNA3.1 انتقال یافت. بیان ژن rBOIFN-y و rHSP70 در شرایط آزمایشگاهی با انجام آزمون الیزای ساندویچ و RT-PCR تایید گردید. مرغها بوسیله پلاسمیدهای نوترکیب ایمن شدند، و آنتیبادیهای زرده از تخم مرغهای جمع آوری شده استخراج گردید. در نهایت اقدام به تایید Lgy اختصاصی تولید شده بر ضد پروتئینهای نوترکیب تولیدی در کشت سلول (COS-7) بوسیله آزمون وسترن بلاتینگ شد. برمبنای نتایج بدست آمده ، حداکثر بیان rBOIFN-y در زمانهای 96 و 144 ساعت بعد از ترانسفکشن در مایه رویی کشت سلول رخ داد و وجود باند 780 جفت بازی در RT-PCR بیان ژن rHSP70 را تایید نمود. باندهای 19/4 و 70 کیلو دالتن (KDa) در آزمون وسترن بلاتینگ، به ترتیب نشان دهنده تولید آنتیبادی Lgy اختصاصی rBOIFN-y و rHSP70 است. باتوجه به نتایج فوق مشخص گردید، آنتیبادیهای تولید شده در مرغ، برای ارزیابی پروتئینهای نوترکیب بیان شده در کشت سلولی مفید میباشد.
Keywords:
Authors
سیدامیرحسین جلالی
پژوهشکده زیست فناوری و مهندسی زیستی، دانشگاه صنعتی اصفهان، اصفهان - ایران
غلامرضا نیکبخت بروجنی
گروه میکروبیولوژی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران
داریوش غریبی
گروه پاتوبیولوژی دانشکده دامپزشکی دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز - ایران
اشرف محمدی
بخش واکسن های ویروسی انسانی موسسه واکسن و سرم سازی رازی کرج، کرج - ایران
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :