ارزیابی پنیر لیقوان از نظر وجود باکتری لاکتوکوکوس گارویه با تکیه بر روش های مبتنی بر کشت و روش مولکولی ژن ناحیه 16sRrna

باکتری لاکتوکوکوس گارویه گونه بیماری زای جنس لاکتوکوکوس بوده که عامل بیماری در انسان (اندوکاردیت) و دام (لاکتوکوکوزیس در ماهی و ورم پستان در گاوهای شیری) است، وجود این باکتری در تولیدات حاصل از شیرخام همانند پنیر لیقوان گزارش شده است. در این پژوهش از شیر تازه، دلمه، پنیر تازه رسیده و همچنین علف تازه منطقه لیقوان جهت ایزوله کردن باکتری استفاده گردید. آزمون های بیوشیمیایی در دمای 10˚C و 45˚C و رشد در غلظت نمک طعام 4% و 6/5% صورت گرفت. سپس استخراج DNS، و واکنش PCR به منظور شناسایی ژن ناحیه 16SrRNA با پرایمر اختصاصی لاکتوکوکوس، انجام شد و آمیلیکون های آن توسط شرکت Source BioScience انگلستان تعیین توالی شدند. سپس در پایگاه داده های ژنی NCBI توالی هایی که بیش از 97% مشابهت داشتند، از نظر جنس و گونه تعیین هویت شدند. در آغاز 1500 ایزوله سپس در ادامه توسط آزمون های دیگر 625 ایزوله و در نهایت 60 ایزوله به عنوان لاکتوکوکوس انتخاب گردید. سپس با تعیین توالی ژن ناحیه 16SrRNA به طور دقیق 2 مورد لاکتوکوکوس گارویه، 2 مورد لویکونوسترک لاکتیس، 5 مورد لویکونوس توک مزونتروئیدس، یک مورد لویکونوسترک گارلیکوم و بیشترین تعداد یعنی 150 ایزوله لاکتوکوکوس لاکتیس گزارش شد. حضور کمرنگ باکتری لاکتوکوکوس گارویه که آن هم در مراحل اولیه تولید پنیر لیقوان بوده است، نوید خوبی برای ایمنی بیشتر پنیر لیقوان از نظر وجود این باکتری بیماری زا می باشد چون در پنیر تازه و پنیر رسیده موردی از حضور این باکتری مشاهده نشد.

Keywords:

لاکتوکوکوس گارویه , آزمون های بیوشیمیایی , 16SrRNA , بیماری زا , پنیر لیقوان