بررسی تاثیر کشندگی ژن Cry3A و ژن gad بر روی لارو سوسک کلرادوی سیب زمینی

آفت کش های بیولوژیکی، اولین فرآورده های حاصل از کاربرد بیوتکنولوژی در کشاورزی هستند که تجاری شده اند. بیشتر آفت کشهایبیولوژیک بر پایه باکتری خاکزی بی هوازی باسیلوس تورنجنسیس که تولید پروتئینهای کریستالی میکند، و برای بسیاری از حشراتسمی می باشد استوار است. هدف از این مطالعه بررسی اثرات کشندگی ژن Cry3A باسیلوس تورنجنسیس و ژن gad برنج رویلاروهای سوسک کلرادوی سیب زمینی در شرایط آزمایشگاهی بود. بدین منظورسازه های بیانی pET-28a-cry3a و pET-32a-gadدر سویه های DH5α ، T7 و BL21 باکتری Ecoli کلون و بیان گردید. عصاره پروتئین جدا شده از کشت باکتری نوترکیب فوق درغلظت های صفر، 55 و 055 با استفاده از روش آغشته سازی برگ مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که تیمار سازه بیانی ژن gadدر سویه T7 باکتری E. coli با غلظت 55 درصد بیشترین درصد کشندگی را روی لارو سوسک کلرادو داشت. بیشترین کاهش رشد لارودر تیمارهای سازه بیانی cry3A در سویه های DH5α و BL21 باکتری E.coil مشاهده شد. علاوه بر این، کمترین خسارت برگی درتیمار سازه بیانی cry3A در سویه های DH5α BL21 باکتری E. coil ، با غلظت 055 بدست آمد.

Keywords:

باسیلوس تورنجنسیس , پروتئین کریستالی حشره کش , زیست سنجی , مهندسی ژنتیک