شناسایی سریع Clostridium perfringens تایپهای A، B،C، D به روش Multiplex PCR

بخشی از فلور perfringens Clostridium طبیعی خاک میباشد و گزارشات متعددی از جدا شدن این ارگانیسم از مواد غذایی خام و پخته وجود دارد. این باکتری به پنج تایپ A تا E تقسیم شده است و این تقسیم بندی بر اساس تولید سم آلفا، بتا، اپسیلون و یوتا میباشد. در این مطالعه از واکنش PCR multiplex جهت شناسایی باکتری perfringens. Cl تایپهای D, C,B, A استفاده شد. تائید اولیه تیپهای باکتریایی مورد استفاده با روش بیوشیمیایی و سرولوژیکی صورت گرفت. جهت شناسایی بوسیله PCR ،چهار جفت پرایمر با دمای ذوب نزدیک به هم طراحی گردید. قطعات تکثیر یافته برای تیپ A ،1167 جفت باز )سم آلفا( و برای تیپ B ،1167 و 1025 و 961 جفت باز )سم آلفا، سم بتا و سم اپسیلون( و برای تیپ C ،1167 و 1025 جفت باز )سم آلفا و سم بتا( و برای تیپ D ،1167 و 961 جفت باز )سم آلفا و سم اپسیلون( بود. جهت بررسی ویژگی واکنش از باکتری botulinum. Cl به عنوان کنترل منفی استفاده شد که نتایج PCR آن با پرایمرهای طراحی شده منفی بود. نتایج این تحقیق نشان داد که شناسایی کلستریدیوم پرفرنجنس با استفاده از PCR multiplex بسیار ساده، حساس، اختصاصی و در حداقل زمان بوده و میتوان جهت تعیین تایپهای perfringens. Cl D, C,B, A استفاده نمود.

شناسایی سریع Clostridium perfringens تایپهای A، B،C، D به روش Multiplex PCR Keywords:

PCR Multiplex , perfringens Clostridium و ژنوتایپ