همسانه سازی و بیان ژن پیلین باکتری Xanthomonas citri subsp. citri

حمیده رئیسی; محمدرضا صفرنژاد; سید مهدی علوی; سید علی الهی نیا

همسانه سازی و بیان ژن پیلین باکتری Xanthomonas citri subsp. citri

Publish place: Journal of agricultural biotechnology، Vol: 10، Issue: 1

Publish Year: 1397

Type: Journal paper

Language: Persian

This Paper With 14 Page And PDF Format Ready To Download

DOWNLOAD Paper

Certificate
I'm the author of the paper

این Paper در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:

کشاورزی > شانکر باکتریایی

Export:

Link to this Paper:

https://civilica.com/doc/864836

Document National Code:

JR_JOAGK-10-1_003

Index date: 10 June 2019

همسانه سازی و بیان ژن پیلین باکتری Xanthomonas citri subsp. citri abstract

بیماری شانکر باکتریایی مرکبات توسط باکتری Xanthomonas citri subsp. citri (Xcc) ایجاد میشود. سیستم ترشحی نوع سه این باکتری دارای یک ساختار خارج سلولی رشته ای است که پروتئینهای باکتریایی را به داخل سلول گیاه وارد میکند. پروتئین پیلین (HrpE) جزء اصلی تشکیل دهنده پیلوس می باشد که توسط ژن HrpE کد می شود. تولید پادتن اختصاصی علیه پروتئین پیلین می تواند به منظور شناسایی گیاهان آلوده و همچنین به عنوان منبع ژنتیکی مقاومت علیه بیماری مورد استفاده قرار گیرد. غیر فعال سازی پروتئین HrpE با استفاده از پادتن می تواند منجر به سرکوب بیماری در گیاه شود. هدف از این تحقیق جداسازی و بیان ژن HrpE و خالص سازی پروتئین حاصل از آن بود. برای این منظور، قطعه ژنی HrpE با استفاده از آغازگرهای اختصاصی جدا و در ناقل pTZ57R/T همسانه سازی شد. بیان این ژن به صورت نوترکیب در ناقل pET28a(+) و در سویه Rosetta باکتری Escherchia coli انجام شد. بهینه سازی تولید پروتئین نوترکیب تحت تاثیر زمان های مختلف، دمای نگهداری و همچنین غلظت های مختلف القا کننده مورد بررسی قرار گرفت. بیشترین مقادیر بیان در دمای 30 درجه سلسیوس و طی زمان 16 ساعت و با IPTG یک میلی مولار به دست آمد. خالص سازی پروتئین نوترکیب HrpE با استفاده از روش کروماتوگرافی تمایلی بر روی ستون نیکل صورت پذیرفت. نتایج آزمون های الکتروفورز پروتئین و وسترن بلاتینگ با استفاده از پادتن های اختصاصی، صحت بیان و خالص سازی پروتئین نوترکیب پیلین را مورد تایید قرار دادند. پروتئین نوترکیب تولید شده می تواند به عنوان آنتی ژن برای تولید پادتن های تخصصی تک همسانه ای و چند همسانه ای مورد استفاده قرار گیرد.

همسانه سازی و بیان ژن پیلین باکتری Xanthomonas citri subsp. citri Keywords:

شانکر باکتریایی مرکبات , پروتئین نوترکیب , سیستم ترشحی تیپ 3 , ژن HrpE , پیلوس

همسانه سازی و بیان ژن پیلین باکتری Xanthomonas citri subsp. citri authors

حمیده رئیسی

دانشجوی دکتری بیماری شناسی گیاهی، دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان، رشت، ایران.

محمدرضا صفرنژاد

دانشیار بخش ویروس شناسی گیاهی، موسسه تحقیقات گیاه پزشکی کشور، سازمان تحقیقات آموزش و ترویج کشاورزی ایران، تهران، ایران.

سید مهدی علوی

استادیار بخش بیوتکنولوژی گیاهی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فن اوری، تهران، ایران.

سید علی الهی نیا

استاد گروه بیماری شناسی گیاهی، دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان، رشت، ایران.

مراجع و منابع این Paper:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :

Alizadeh A, Rahimian H (1990). Citrus canker in Kerman province. ...

Ariannejad H, Nassiri MR, Aslaminejad A, Tahmoorespour M, Valizadeh R, ...

Ausubel F, Brent R, Kingstone R, Moore D, Seidman JG, ...

Berlec A, Jevnikar Z, Majhenic AC, Rogelj I, Strukelj B ...

Buttner D, Yang H (2009). Type ΙΙΙ protein secretion in ...

Cornelis GR, Gijsegem FV (2000). Assembly and function of type ...

Duan YP, Castaneda AL, Zhao G, Erdos G, Gabriel DW ...

Ebrahimi Y (2009). Citrus situation in Iran. Ministry of Jihad ...

Fao (2014). FAOSTAT, production, from http://www.fao.org. ...

Fischer R, Emans N, Schillberg S (2001). Achieving plant disease ...

Fu W, Lin J, Cen P (2007). 5-Aminolevulinate production with ...

Gottwald TR, Graham JH, Schubert TS (2002). Citrus Canker: The ...

Graham JH, Gottwald TR, Cubero J, Achor D (2004). Xanthomonas ...

Huang J, Ru B, Dai P (2011). Bioinformatics resources and ...

Khatabi B, He B, Hajimorad MR (2012). Diagnostic potential of ...

Khodakaramian G, Rahimian H, Mohamadi M, Alameh A (1999). Phenotypic ...

Koebnik R (2005). The type III-dependent Hrp pilus is required ...

Le Gall F, Bove JM, Garnier M (1998). Engineering of ...

Mokhtari M, Safarnejad MR, Alavi SM, Torkamanzehi A (2015). Isolation, ...

Nanni V, Bertolini P, Baraldi E, Zanetti M, Dalla Serra ...

Nino-liu DO, Ronald PC, Bogdanove AJ (2006). Xanthomonas oryzae pathovars: ...

Perrie Y, Mohammed AR, Kirby DJ, McNeil SE, Bramwell VW ...

Roohani R, Soltani Najafabadi M, Alavi SM, Farrokhi N, Shamsbakhsh ...

Rosano GL, Ceccarelli EA (2014). Recombinant protein expression in Escherichia ...

Sadeghi HMM, Rabbani M, Rismani E, Moazen F, Khodabakhsh F, ...

Safarnejad MR, Salehi Jouzani GR, Tabatabaie M, Twyman RM, Schillberg ...

Safarpur H, Safarnejad MR, Tabatabaei M, Mohsenifar A (2012). Developing ...

based high-throughput screening for evaluation of sugar beet germlines against ...

Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T (1996). Molecular Cloning - ...

Schaad NW, Postnikova E, Lacy GH, Sechler A, Agarkova I, ...

Schaad NW, Postnikova E, Lacy G, Sechler A, Agarkova I, ...

Schoulties CL, Civerolo EL, Miller JW, Stall RE, Krass CJ ...

Shahryari F, Shams-Bakhsh M, Safarnejad MR, Safaiee N, Ataie Kachoiee ...

Shiotani H, Fujikawa T, Ishihara H, Tsuyumu S, Ozaki K ...

Swarup S, Yang Y, Kingsley MT, Gabriel DW (1992). An ...

Tegel H, Tourle S, Ottosson J, Persson A (2010). Increased ...

Thaitrong N, Charlermroj R, Himananto O, Seepiban C, Karoonuthaisiri N ...

Weber E, Ojanen-Reuhs T, Huguet E, Hause G, Romantschuk M, ...

نمایش کامل مراجع