جداسازی و شناسایی توکسین های گونه Alternaria tenuissima در منطقه بیرجند

قارچ آلترناریا بیمارگر مهم گیاهی است که طیف وسیعی از محصولات زراعی و باغی را آلوده کرده و خسارت اقتصادی به بارمی آورد. گونه های این قارچ بسته به مرحله رشدی قادر به تولید توکسین های اختصاصی یا غیر اختصاصی موثر بر میزبان هایخود هستند. این تحقیق در سال 97 - 1396 با هدف بررسی تولید توکسین در جدایه های Alternaria tenuissimaجداسازی شده از خاک منطقه بیرجند و اثر آنها بر روی بافت برگ شمعدانی معمولی و گوجه فرنگی انجام گردید. جداسازیقارچ، از خاک منطقه بیرجند با کشت سوسپانسیون عصاره خاک بر روی محیط کشت زاپک آگار حاوی رزبنگال صورتگرفت. شناسایی جدایه قارچی با استفاده از خصوصیات مورفولوژیک بر روی محیط سیب زمینی هویج آگار و تعیین توالینواحی ITS ، ALT و GDP صورت گرفت. متابولیت ها از کشت 21 روزه قارچ آلترناریا درون محیط مایع سیب زمینیدکستروز (PDB) با استفاده از حلال های آلی کلروفورم _ استون به نسبت 12:88 استخراج شدند. شناسایی توکسین ها بااستفاده از کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا (HPLC) صورت گرفت. تاثیر توکسین ها بر روی بافت گیاهی با تزریقمتابولیت های استخراج شده به وسیله سرنگ به درون برگ شمعدانی و گوجه فرنگی مطالعه شد. براساس خصوصیاتمورفولوژیکی و مولکولی، جدایه این تحقیق به گونه A. tenuissima تعلق داشت. تزریق توکسین ها به درون برگشمعدانی منجر به ایجاد کلروز و نکروز بافت پس از 4 روز گردید، اما بر روی گیاه گوجه فرنگی تاثیری نداشت. نتایج آزمونHPLC منجر به شناسایی توکسین های Alternar iol (AOH) ، Altenune(ALT) ، ether(AME)Alternariol monomethyl ، Tentoxin(TTX) در این جدایه گردید.

Keywords:

آلترناریا , رزبنگال , کروماتوگرافی , توکسین