کلونینگ و بیان ژن رسپتور ویتامین btuB(B12) از باکتری اشریشیاکلی H7:O157
Publish place: First National Congress of Veterinary Laboratory Sciences
Publish Year: 1388
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 283
نسخه کامل این Paper ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
VETLAB01_399
تاریخ نمایه سازی: 24 شهریور 1398
Abstract:
هدف: هدف از این کار کلون ژن مسوول تولید پروتئین انتقال دهنده ویتامین B12 از باکتری اشریشیاکلی H7:O157 و تولید پروتئین نوترکیب است . مواد و روش کار: ژن btuB با طراحی پرایمر با دستگاه PCR تکثیر می شود. پرایمر دارای سایت برش برای آنزیم های محدود کننده ویژه می باشد. وکتور ویژه برای کلون و بیان ژن انتخاب می شود. هم محصول PCR و هم وکتور با آنزیم های محدود کننده هضم شده و سپس به وسیله آنزیم لیگاز به هم متصل می شوند. Construct به میزبان E.ColiBL21 انتقال می یابد. قبل از انتقال سازه به میزبان باید سلول مستعد تهیه شود. بعد از Transformation، سلول های ترنسفورم با IPTG برای بیان ژن القاء و سپس -SDSPAGE می شوند. نتایج و بحث : با تکثیر ژن btuB از باکتری H7:E.Coli O157، مشخص شده است که این ژن دارای 1845 نوکلئوتید است و نهایتا بیان ژن 1845 نوکلئوتیدی و تولید پروتئین BtuB
Keywords:
Authors
مجید علی پور
دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم
مریم قاجار کوهستانی
دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم
فریبا احمدی
دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم