کاربرد توأم روش جداسازی ایمیونومگنتیک و واکنش زنجیره ای پلیمراز چندگانه ای جهت جستجو و ردیابی سالمونلاانتریکا تحت گونه انتریکا سرو وار تیفی موریوم در نمونه های مدفوع اسهالی گاو

در این تحقیق تعداد 400 نمونه مدفوع اسهالی گاو و وساله اخذ و به موازات آزمایش های متداول کشت میکروبی و سرو تایپینگ، بر ریو نمونه ها آزمایش جداسازی با ذرات آهن ربای ایمن (ایمیونومگنتیک) و واکنش زنجیره ای پلیمراز چندگانه ای انجام گرفت. برای شناسایی سالمونلاها در سطح جنس از پرایمر عمومی inv-A و جهت جستجو و ردیابی سرو وار تیفی موریوم از سه جفت پرایمر اختصاصی FIjb, Rtbj و Flic مربوط به توالی زن های سنتزه کننده پادگن های (H(2): 1, 2, O(4 و (H(1 استفاده شد. از 400 نمونه مدفوع اسهالی گاو و گوساله که مورد آزمایش باکتریولوزیک قرار گرفت تعداد 33 مورد (8/25 درصد) سالمونلاجدا گردید. سالمونلا انتریکا سرووارتیفی موریوم با 22 مورد (66/7 درصد)، سالمونلا دابلین با 3 مورد (9/1 درصد)، سالمونلا ویرشو و سالمونلاگلوچستر هر کدام با 2 مورد (6/1 درصد)، سالمونلا انتریتیدیس، سالمونلا جورجیا، سالمونلاآگوستنبورگ و سالمونلالیندنبورگ هر کدام با 1 مورد (3 درصد) بالاترین فراوانی را به خود اختصاص دادند. در آزمایش PCR چندگانه ای با استفاده از پرایمرهای مربوطه، چهار نوع محصول افزایش یافته 663، 526، 284 و 183 جفت بازی به ترتیب مربوط به زن های inv-A, fljb, rfbj و flic در کلیه نمونه های واجد سروتیپ تیفی موریوم (1, 4, 5, 12:i:1, 2) مشاهده شد. نتایج این تحقیق نشان داد که تشخیص اختصاصی سرووار تیفی موریوم با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن های بیان کننده پادگن های (H(1):I, O(4 و H(2):1, 2 می تواند بسیار موفقیت آمیز باشد، زیرا تنها سرووار است که از بین 2550 سرووار سالمونلا این نوع الگوی پادگنی را دارد.

Keywords:

سالمونلاتیفی موریومف ایمیونومگنتیک , PCR چندگانه ای , مدفوع , ژن های inv-A , fljb , rfbj