تشخیص و تفریق اولیه تعدادی از جدایه های مایکوپلاسماسینوویه ایران به روش PCR بر اساس تکثیر بخشی از ناحیه انتهایی 5 ژن VlhA

مایکوپلاسماسینوویه بعنوان یک عامل بیماریزای دخیل در عوارض تنفسی و لنگش، خسارات اقتصادی قابل توجهی را متوجه صنعت طیور در ایران می سازد. لذا تشخیص سریع و قطعی آلودگی و نیز تفریق سویهها از ابزارهای کلیدی در پیشگیری و کنترل می باشد. هدف از این مطالعه جداسازی میکروارگانیزم و تشخیص، شناسایی و نیز تفریق سویه های رایج در ایران بویزه سویههای فیلد و واکسن به روش مولکولی بود. از 11 مرغداری در مناطق مختلف کشور هر کدام تعداد 20 نمونه خون جهت آزمایش تست سریع آگلوتیناسیون و الایزا، 10 نمونه سراب نای و شکاف کامی و بافت بمنظور کشت و نیز 9 نمونه سراب جهت آزمایش PCR اخذ گردید. بمنظور تشخیص این میکروارگانیزم بروش مولکولی، علاوه بر پرایمرهای 16srRNA، برای اولین بار در کشور از جفت پرایمر مربوط به انتهای آمینی ژن VIhA استفاده گردید. نتایج حاصله از روش PCR با استفاده از جفت پرایمر اخیر نشان داد که علاوه بر امکان شناسایی گونه مایکوپلاسما سینوویه در مورد نمونه های مورد آزمایش، اندازه محصول PCR بدست آمده در سویه های مختلف شامل جدایه های بدست آمده، سویه استاندارد و سویه واکسن بین 350 تا 400 جفت باز متفاوت بود. مقایسه نتایج این روش با روشهای سرولوژی و جداسازی و نیز روش PCR معمول با استفاده از پرایمرهای مربوط به زن 16srRNA از یکسو و نیز اختلاف اندازه در باندهای ایجاد شده در سویه های مختلف از سوی دیگر دلالت بر آن دارد که روش PCR با استفاده از پرایمرهای مربوط به زن vlhA می تواند در مورد نمونه های بالینی بعنوان یک روش با حساسیت و ویزگی بالا جهت تشخیص گونه مایکوپلاسما سینوویه و نیز تفریق اولیه سویهها اعم از واکسن یاسویه فیلد مطرح باشد.

Keywords:

مایکوپلاسماسینوویه , جداسازی , تفریق , PCR , VlhA