انتقال ناحیه کد کننده آنتی ژن سطحی HBsAg ویروس هپاتیت ب به ریز جلبک Dunaliellasalina

در این تحقیق قابلیت استفاده از این ریزجلبک برای تولید و بیان آنتی ژن سطحی HBsAg مورد بررسی قرار می گیرد. برای این منظور با استفاده از بانک های اطلاعاتی ناحیه کد کننده زیر واحد کوچک آنتی ژن سطحی HBsAg مشخص گردیده و ژن تولید کننده مربوطه جهت بیان مناسب درسیتم سلولی جلبک D. salina بهینه سازی و به صورت مصنوعی ساخته گردید. ترادف فوق درابتدا به توسط هضم آنزیمی از وکتور همسانه ساز pMK جدا و با سایت های مشابه در وکتور بیانی pCAMBIA3300 ، که حاوی ژن انتخاب گر bar می باشد، وارد گردید. تایید مراحل مختلف همسانه سازی با استفاده از آزمون های PCR، هضم آنزیمی و تعیین ترادف صورت گرفت. انتقال ژن به جلبک D. salina با استفاده از روش های همزدن با ذرات شیشه و بمباران با تفنگ ژنی صورت پذیرفت. جلبک های تراریخته بر روی محیط کشت انتخابی حاوی علف کش باستا قرارگرفته و پس از تکثیر سلول های تراریخته مقاوم به علف کش آزمون های تکمیلی مولکولی صورت پذیرفت. نتایج این آزمون ها حاکی از تولید سلول های جلبک تراریخته و همچنین حضور و بیان ژن HBsAg در سلول های جلبک تراریخته می باشد.

Keywords:

کشاورزی مولکولی , آنتی ژن سطحی هپاتیتB , ریز جلبک , دونالیلا سالینا , انتقال ژن