تشخیص عفونت ویروسی لوسمی گاو با استفاده از روش Nested-PCR

ویروس لکوز گاو ) BLV ) رترو ویروسی است که موجب لکوز یا لمفومای مزمن گاو در بسیاری از کشورهای جهان میشود. الیزا اولین روش تشخیصی برای غربالگری حضور پادتن ها بر علیه ویروس لکوز گاوی است. تا کنون روشن نشده است که آیا این روش پادتن ها را در زمان آلودگی به ویروس لوسمی گاو شناسایی میکند یا خیر. واکنش زنجیره ای پلی مراز )PCR ) برای توالیهای اختصاصی DNA پروویروس هدف، در سلول های تک هسته ای خون محیطی )PBML )استفاده شده است. به منظور یافتن روشی حساس و کارا برای تشخیص آلودگی به ویروس BLV در نمونههای خون و بافتها یا محتواهای مختلف، روش آشیانهای واکنش زنجیره ای پلی مراز )PCR-Nested )بر اساس شناسایی ژن gag-BLV طراحی گردید. آزمون آشیانه ای PCR بر روی نمونههای اخذ شده از گاوهایی که به صورت طبیعی آلوده شدهاند )281 نمونه(، نمونههای بافتی پارافینی)3 نمونه( و DNAی تخریب شده )10 نمونه عقده لمفاوی سونیکه( انجام شد. حساسیت و ویژگی آزمون PCRبه ترتیب 85/0 و 84/0محاسبه گردید. درجه توافق بین دو آزمون )کاپا( مقدار 693/0 محاسبه گردید که قابل توجه است. ارزش پیشگویی مثبت آزمون )دقت( 82/0 و ارزش پیشگویی منفی آن 86/0 بود . در نهایت صحت آزمون 85/0 محاسبه شد. این مطالعه نشان داد که روش واکنش زنجیره ای پلی مراز آشیانهای در مقایسه با روش های PCR معمولی استفاده شده در آزمایش های متفاوت از حساسیت بیشتری برخوردار است. این تکنیک برای غربالگری انبوه و همچنین تشخیص DNAپروویروس در نمونه های بافتی خاص اعم از پارافینه یا نمونه های قدیمی مفید خواهد بود.

Keywords:

ویروس لکوز گاو , ردیابی ملکولی , واکنش زنجیره ای پلی مراز آشیانهای , الیزا