تشخیص مولکولی ذرت های تراریخته براساس پیشبر P35S

در دو دهه ی اخیر مهندسی ژنتیک با استفاده از علم بیوتکنولوژی باعث تولید محصولات تراریخته درجهان شده است. آمار رو به رشد سطح کشت محصولات تراریخته در سرتاسر دنیا حاکی از اهمیتویژه ی تراریخته ها و افزایش استفاده ی عموم مردم از این مواد غذایی است. ذرت یکی از مهمترینمحصولات تراریخته است که در بسیاری از کشورها به میزان زیادی کشت و مصرف میشود. هدف ازاین پژوهش شناسایی ذرت های تراریخته با استفاده از روش مولکولی حساس و اختصاصی واکنشزنجیرهای پلیمراز (پی.سی.آر) است که قابلیت جداسازی موادغذایی تراریخته از غیرتراریخته را دارااست. این پژوهش انجام شده با هدف تشخیص ذرت های تراریخته در سبدکالای مصرف کنندگانایرانی بر پایه ی (پی.سی.آر) و آغازگر اختصاصی P35S است. در پژوهش های پیشین در ایران چندنمونه ذرت مشخص یا وارداتی در ایران مورد بررسی قرار گرفته بود. در این پژوهش سه نمونه یتراریخته ذرت از گمرک شیراز تهیه و دی.ان.ا سی وهفت نمونه ی ذرت جمع آوری شده ازبازارمصرف هفت شهر بزرگ و شش نمونه ذرت جهادکشاورزی، بهروش استاندارد CTAB)ستیل تری متیل آمونیوم بروماید) استخراج شد. آزمون پی.سی.آر شناسایی ذرت با استفاده از ژنبومیاینورتاز( IVRکه در تمام ارقام ذرت وجود دارد) انجام شد. جهت شناسایی ذرت های تراریختهآزمون پی.سی.آر براساس پیشبر ( P35Sآغازگر اختصاصی CaMV 35sموجود اکثر وکتورها) باآغازگرهای اختصاصی P35S2 و P35S1 بهینه شد. محصول IVR و P35S جهت تعیین توالی و تهیهکنترل مثبت کلون شد. آزمون پی.سی.آر ژن IVR و پیشبر P35S بر روی نمونه ها بهینه سازی وآمپلیکون 226 bp و 195 bp به ترتیب تکثیر شد. هر دو محصول پی.سی.آر به روش T/A Cloningوبا استفاده از پلاسمید pTZ57R و میزبان JM107E.coli کلون شد. از میان چهل و شش نمونه ذرتجمع آوری شده از بازارمصرف، گمرک و جهادکشاورزی 100درصد به لحاظ ژنبومی اینورتاز و 56,5درصد ( 26عدد) از نمونه ها به لحاظ اگزوژن P35S دارای جواب مثبت بودند. این پژوهش نشانمیدهد که درصدبالایی از ذرت های مصرفی در بازار ایران براساس واکنش زنجیرهای پلیمرازتراریخته است. با این وجود هیچ اقدامی جهت برچسب گذاری و آگاهی مصرف کننده صورت نگرفتهاست

Keywords:

پیشبر P35S , ذرت تراریخته , واکنش زنجیرهای پلیمراز , واردات , مهندسی ژنتیک