بررسی اثر جایگزینی miR-143 در مهار متاستاز سلول های MDA-MB468 سرطان سینه

سرطان سینه رایج ترین سرطان در میان زنان و دومین علت رایج مرگ ناشی از سرطان است. عوامل ژنتیکی، عفونی، محیطی، اپیژنتیک و miRNA ها در ایجاد این سرطان دخیل هستند miRNA ها مولکول های RNA کوچک 21-25 نوکلیوتیدی هستند که با اتصال به mRNA هدف در تنظیم بیان ژن نقش اساسی دارند. این RNA ها به دو دسته انکوساپرسور و انکوژن دسته بندی شده اند. از miRNA های تومورساپرسور که در سرطان سینه دچار کاهش بیان می شود mir-143 می باشد. در نتیجه کاهش بیان این miRNA بیان ژن های E CXCR4,vimentin، MMP-9،cadherin ، دچار تغییر می گردد. این ژن ها در مهاجرت و متاستاز نقش دارند. یکی از اهداف درمانی در سرطان سینه بازگرداندن میزان بیان miRNA های تومورساپرسور به سطح طبیعی در سلول های سرطانی سینه می باشد که توسط تکنیک miRNA replacement therapy انجام می گیرد. برای این منظور ابتدا سلول های سرطانی سینه در محیط کشت RPMI حاوی FCS 10% در دمای 37ͦ C و 5% CO2 کشت داده شد. سپس ژن miR-143 همراه وکتور و معرف ترانسفکت کننده Lipofectamin 2000 به محیط کشت اضافه گردید انکوباسیون انجام گرفته، بعد از گذشت زمان لازم میزان بیان miR-143 و ژن های CXCR4 MMP-9، E-cadherin و vimentin بوسیله qRT- PCR اندازه گیری شد. میزان رشد و پرولیفراسیون سلول های سرطانی توسط تکنیک MTT مورد بررسی قرار گرفت. میزان مهاجرت و متاستاز سلول های سرطانی بعد از ترانسفکت miR-143 به وسیله آزمایش Wound healing assay بررسی گردید. نتایج به دست آمده، بیانگر کاهش متاستار و افزیش بیان ژن های miR-143 و E-cadherin و کاهش بیان CXCR4، MMP-9 و vimentin بعد از ترانسفکت می باشد

Keywords:

سرطان سینه , جایگزینی miR--143 , متاستاز , انکوساپرسور