بهینه سازی انتقال ژن به جو و تولید گیاهان تراریخته بارور با استفاده از آگروباکتریوم

در سال ھای اخیر انتقال ژن به غلات به ابزار مھمی برای بھبود صفات زراعی گیاھان تبدیل شده است. جو یکی از با اھمیت ترین غلات دانه ای است که اصلاح آن برای افزایش تحمل به تنش ھای زیستی و غیرزیستی از طریق انتقال ژن ھمانند سایر گیاھان زراعی از اھمیت زیادی برخوردار است. بھینه سازی عوامل مختلف موثر در تراریزش و باززایی گیاھان تراریخته اولین قدم در برنامه ھای انتقال ژن به گیاھان محسوب می شود. در این پژوھش برخی عوامل موثر در تراریزش جو به وسیله آگروباکتریوم مانند سویه باکتری، غلظت آگروباکتریوم، مدت زمان ھم کشتی و محیط تلقیح باکتری مورد بررسی قرار گرفت. برای تاییدحضور ژن ھای انتقالی در گیاھان تراریخته احتمالی از آزمون PCR و برای بررسی بیان ژن ھای انتقالی از آزمون بیان ژن GFP استفاده شد. باززایی ریزنمونه ھای تراریخته با موفقیت انجام و گیاھان تراریخته بارور حاصل گردید. نتایج نشان داد که سویه LBA4404 و AGL1 به عنوان موثرترین سویه ھای آگروباکتریوم و غلظت OD600=1 به عنوان مناسب ترین غلظت در تراریزش ریزنمونه ھای جنین نارس جو عمل کرده اند. ھمچنین استفاده از محیط تلقیح LB و مدت زمان ھم کشتی دو روزه ریزنمونه ھا با آگروباکتریوم، بیشترین میزان تراریزش در جو را بدنبال داشت.

Keywords:

آگروباکتریوم , تراریزش , جو , هیگرومایسین , GFP