تعیین آنتی ژن و DNA در توکسوپلاسما گوندی در مرحله حاد عفونت در انسان و گاو با روش های ایمونوبلاتینگ و PCR

هدف: توکسوپلاسما گوندی از تک یاخته های ایجاد کننده بیماری در انسان و بسیاری از حیوانات خونگرم است . ابتلا به عفونت در زنان باردار سبب ایجاد عوارض شدید مغزی و عصبی در جنین می شود. همچنین این انگل یکی از عوامل مهم سقط جنین در حیوانات محسوب می شود. تشخیص سریع عفونت در مرحله حاد، درمان سریع و بهبود بیماری را به دنبال دارد. همچنین تشخیص زودهنگام انگل در گاو و گوسفند باعث بهبود شاخص های تولید مثلی و کاهش هزینه مربوط به آن می شود. در این رابطه تشخیص انگل و اجزای آن، تعریف بهتری از عفونت حاد به دست می دهد. مواد و روش کار: در این بررسی ، 20 نمونه سرم از افراد مبتلا به توکسوپلاسموز حاد جمع آوری شد. آنتی ژن محلول توکسوپلاسما با استفاده از روش سونیکاسیون از تاکی زوئیت های سویه RH استخراج شد. آنتی بادی پلی کلونال با استفاده از روش های رسوب سرم در نمک و کروماتوگرافی تبادل یونی از سرم خرگوش ها استخراج شد. آزمون ایمونوبلاتینگ با استفاده از این آنتی بادی برای تشخیص آنتی ژن توکسوپلاسما راه اندازی شد. آزمون PCR با استفاده از یک جفت پرایمر از ژن B1 تک یاخته برای تشخیص وجود DNA در آن در این نمونه سرم ها انجام شد. نتایج و بحث : در یک نمونه از این بیست سرم نوار قوی 30 کیلو دالتونی آنتی ژن با روش ایمونوبلاتینگ مشاهده شد. در این سرم قطعه pb 570 حاصل از تکثیر DNA در انگل با روش PCR نیز مشاهده گردید. این نتایج مثبت در هر دو آزمون مربوط به فردی بود که در محیط آزمایشگاه با سویه تقریبا بیماریزای C56 به صورت اتفاقی آلوده شده بود و در فاز حاد بیماری قرار داشت و همچنین در 5 نمونه از 50 سرم گاو های یک گاوداری نیز به اثبات رسید. نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که توکسوپلاسموز در مرحله حاد با روش های ایمنوبلاتینگ و PCR قابل تشخیص است که این امر در تشخیص و درمان توکسوپلاسموز مادرزادی و در مبتلایان به نقص سیستم ایمنی نقش حیاتی دارد و همچنین با ردیابی سریع آن در فارم مدیریت و حذف سریع دام های آلوده با این روش راحت ترو دقیق تر انجام می گیرد

Keywords:

توکسوپلاسما گوندی , ایمونوبلاتینگ و PCR