استفاده از روش های مولکولی در تشخیص بیماری های باکتریایی و ویروسی طیور

هدف: تشخیص بیماری های باکتریایی و ویروسی طیور با استفاده از روش های مولکولی و رد یابی عوامل بیماری و مقایسه آن با روش های سنتی با گرفتن نمونه از ارگان های طیور و آماده سازی جهت استخراج DNA و RNA با روش دستی فنول- کلروفرم و کیت استخراج شرکت Roch استخراج انجام می شود و با دستگاه نانودراپ می توان غلظت آن را تعیین کرد سپس با مواد RT-PCR ،PCR و پرایمرهای اختصاصی واکنش زنجیره ای پلی مراز را طراحی کرده و با استفاده ازدستگاه Termocycler قطعه مورد نظر را تکثیر می گردد. بعد از آن با تهیه ژل آگارز 1% در بافر 0.5X TBE اتیدیوم بروماید و الکترفورز افقی قطعات تکثیر شده را از هم جدا و با اشعه UV مشاهده گردید. نتایج و بحث : روش های مولکولی جدید و پیشرفته اخیر در زمینه علوم سلولی و مولکولی در جهت تشخیص بیماری های میکروبی جایگزین روش های بسیار وقت گیر و سنتی تشخیصی شده است . به وسیله پرایمرهای اختصاصی به راحتی و در زمانی کم ، با راه اندازی واکنش زنجیره ای پلی مراز می توان در جهت تشخیص بسیاری از عوامل پاتوژن اقدام کرد. همچنین متداول ترین روش تشخیص بیماری های ویروسی طیور، جداسازی ویروس در تخم مرغ های جنین دار SPF و انجام آزمایش های سرولوژی می باشد اما اکنون ردیابی ویروس به روش جداسازی و RT-PCR قابل انجام است . حساسیت و ویژگی این روش ها بسیار بالاتر از روش های گذشته می باشد و در زمان کوتاهی می توان بیماری را تشخیص داد. باید توجه داشت که در بسیاری از موارد ترکیب روش های سنتی و جدید مفید تر واقع می شود. شایان ذکر است که آموزش و نحوه جایگزینی صحیح روش های جدید به جای روش های قدیم و استانداردسازی در فضاها، تجهیزات و روش های آزمایشگاهی در سطوح آزمایشگاه های تشخیص مولکولی باعث کاهش نتایج کاذب شده و اطمینان بیشتری را در خصوص نتایج گزارش شده ایجاد می کند.

Keywords:

DNA , RT-PCR , RNA , سلولی مولکولی , ویروس