بیان فاکتور ده در رده های سلولی MDCK و 21-BHK برای افزایش کارایی تکثیر ویروس آنفلوانزا پرندگان تحت تیپ H9N2
صاحب اثر: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
نوع محتوی: طرح پژوهشی
Language: Persian
استان موضوع گزارش: کرمان
شهر موضوع گزارش: کرمان
Document ID: R-1053897
Publish: 16 February 2019
دسته بندی علمی: علوم کشاورزی
View: 531
Pages: 46
Publish Year: 1394
نسخه کامل Research منتشر نشده است و در دسترس نیست.
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
Abstract:
جداسازی ویروس در تخم مرغ یا کشت سلول، روش بسیار حساس و ارزشمند برای تشخص عفونت ویروسی است. عوامل متعددی مانند افزودن تریپسین رشد ویروس های آنفلوانزا تحت حاد در کشت های سلولی را محدود می کنند. برای تولید رده سلولی که توانایی برش و فعال کردن هماگلونینین (HA) ویروس های آنفلوانزا را داشته باشد، کلون cDNA مربوط به فاکتور 10 (FX) جدا شده از جنین جوجه در وکتور pcDNA1.3 بیان شده و به هر یک از سلول های 21-BHK و MDCK انتقال داده شد. سپس پویایی رشد ویروس آنفلوانزا H9N2 در سلول های BHK-21/FX و MDCK/FX با در نظر گرفتن نقش این پروتیاز سلولی در عفونت زایی ویروس، بیان ژن ماتریکس ویروس، و تعیین خواص مولکولی طی هفت پاساژ متوالی ارزیابی شد. نتایج اولیه بیان گر این است که پلاسمید FX پیامد پاساژهای متوالی در این سلول ها بیان شده و تغییر ریخت شناسی در سلول ها مشاهده نمی شود. این سلول ها توانایی برش HA ویروس H9N2 در دز عفونی کننده 0/01 را دارند و ورود ویروس بدون نیاز به ترپسین پشتیبانی می شود. پویایی رشد ویروس در سلول های BHK-21/FX و MDCK/FX با عیارسنجی ویروس ارزیابی شد. داده ها بیان گر تکثیر مناسب ویروس در این سلول ها طی پاساژهای متوالی است و میزان آن در این دو سلول تفاوت چشمگیری ندارد. آنالیز مقایسه ای توالی ژن های ویروس نشان داد که هیچ تغییری در توالی اسیدهای آمینه رخ نداده است. نتایج این پژوهش نشان دهنده کاربرد بالقوه سلول های BHK-21/FX و MDCK/FX برای تکثیر ویروس آنفلوانزا H9N2 با عیار بالا و مطالعات مرتبط با آن است. واژگان کلیدی: ویروس آنفلوانزا، پویایی رشد، هماگلوتینین، فاکتور ده، پروتیاز سلولی