یک سیستم اعمال نفوذ ژنتیکی چند منظوره و استفاده از آن در بیان سطح بالا یک جهش بی- ماناناز با فعالیت خاص بالا در پی.پاستوریس

به منظور هر چه بیشتر کاربرد عملی یک مقاومت حرارتی و ا سیدی بی- ماناناز در مواد افزودنی خوراک دام ، یک استراتژی موثر که ترکیب تکامل هدایت شده و مهندسی متابولیک با شد ، توسعه داده شد. چهار جهش مثبت ( P۱۹۱M , P۱۹۴E , S۱۹۹Gو (S۲۶۸Q با فعالیت ویژه افزایش یافته (%۶۰,۹-%۲۵,۵) به دست آمد. جهش ۵۶,۷ S۱۹۹G افزایش فعالیت ویژه را در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد و مقاومت حرارتی خوب را به نمایش می گذارد، و این برای بیان سطح بالا در پی. پاستوریس X۳۳ انتخاب شد. یک سی ستم د ستکاری ژنتیکی چند منظوره و بدون زخم پی شنهاد شده و عملکرد آن تایید شده ا ست (حذف ژن ، جایگزینی / درج و جهش نقطه ای). سپس این مورد برای حذف بازده آنزیم در پی. پاستوریسX۳۳VIIManAKS۱۹۹G تحت حذف Rox۱p و بیان هموگلوبین ویتروا سیل قرار گرفت. نژادی عالی ، به نام X۳۳VIIManAKS۱۹۹GΔ rox۱::VHb ، با ترکیب این دو عامل به د ست آمد و سپس حداکثر فعالیت آنزیمی بیشتر به U ml-۱ ۳۷۵۳ افزایش یافت ، که تقریبا دو برابر بیشترین تولید ManAK در پی.پا ستوریس بود. این کار یک روش منظم و موثر برای بهبود عملکرد آنزیمی بی-ماناناز فراهم می کند، که باعث افزایش استفاده از ManAK در مواد افزودنی خوراک می شود و همچنین نشان داد که یک ابزار دستکاری ژنتیکی بدون زخم در پی. پاستوریس مفید است.

Keywords:

پی. پاستوریس , بی-ماناناز , ژنتیک , سیستم اعمال نفوذ