مروری بر شناسایی ویروس ها با استفاده از تکنیک کشت سلول

در روش کشت سلول، سلول های جدا شده از حیوانات یا گیاهان در یک محیط مصنوعی مطلوب کشت داده شده و رشد می کنند. این سلول ها ممکن است قبل از کشت به طور مستقیم از بافت و به وسیله آنزیم یا روش های مکانیکی جدا شده باشند، و همچنین می توانند از یک رده ی سلولی یا اولین رده ی سلولی که قبلا ایجاد شده است، مشتق شده باشند. فن آوری کشت سلول و بافت جایگاه مهمی در تحقیقات زیست پزشکی مدرن دارد. سلول های کشت شده سیستم های الگویی مفیدی برای مطالعه فیزیولوژیک و فرآیندهای بیوشیمیایی طبیعی در سلول ها ایجاد کرده که حتی می توان آن ها را برای اهداف تشخیصی نیز مورد استفاده قرار داد. مهم ترین مزیت استفاده از روش های کشت سلول، انسجام و تکرارپذیری به دست آمده از آن است. از دیگر مزیت های آن می توان به کاهش استفاده از حیوانات اشاره کرد.با کشف کشت سلول، بسیاری از ویروس های انسانی توانستند در محیط آزمایشگاه روی سلول ها رشد کنند[۴]. اولین واکسن ویروسی با استفاده از روش های اولیه و ابتدایی کشت سلول به دست آمد. با پیشرفت کشت سلول و فراهم شدن رده های سلولی مختلف و توسعه معرف های خالص به صورت تجاری، پنجره جدیدی برای تشخیص ویروس ها باز شد. امروزه برای تشخیص ویروس ها به طور گسترده ای از رده های سلولی استفاده می شود که ازجمله مهم ترین آن ها می توان RhMK اولیه، سلول های اولیه کلیوی خرگوش، MRC-۵، فیبروبلاست هایforeskin انسان، HEp-۲ و A۵۴۹ را نام برد.یک روش سریع و دقیق استفاده از رده های سلولی تراریخته است. برخی از عناصر ژنتیکی به سلول ها وارد شده و می توانند ویروس های خاصی را شناسایی کنند. این عناصر را از هر موجود زنده ای می توان گرفت. برای مثال در مورد ویروس HIV، از رده سلولی لنفوئیدی ۴CD مثبت استفاده شد که به وکتور رتروویروس از جمله پروموتر LTR در ترکیب با ژن کلرامفنیکول استیل ترانسفراز و HeLa تبدیل می شود. با استفاده از این رده سلولی تراریخته، تنها ویروس HIV شناسایی شد ولی قادر به تفکیک HIV-۱ از ۲ نیست.در حدود دو دهه ی اخیر، نوآوری های زیادی در کشت سلول رخ داده است؛ حتی زمان شناسایی ویروس در کشت سلول از ۵ تا ۱۰ روز به ۲۴ ساعت کاهش یافت است. به هر حال، جهت شناسایی دقیق ویروس ها لازم است آزمایش های دقیق تری مانند روش های مولکولی به همراه کشت سلول انجام شوند.

Keywords:

کشت سلول , ویروس , رده های سلولی تراریخته , شناسایی , روش مولکولی.