بررسی و مقایسه تنش های حرارتی و شیمیایی در القاء جنین زایی میکروسپور در ارقام کلزا (Brassica napus L.)

هدف از این آزمایش بررسی و مقایسه تنش های حرارتی و شیمیایی اعمال شده بر میکروسپور به منظور بهینه سازی جنین زایی میکروسپور و باززایی گیاهان دابل هاپلوئید در گیاه مدل کلزا می _باشد. برای این منظور ارقام بهاره Hyola 420 ،Hyola401 و Hyola 308 به عنوان مواد گیاهی انتخاب شدند. اثر تنش های مختلف شامل گرما، تریفلورالین، اورایزلین و 4-D ، ا2 برروی القاء جنین زایی میکروسپور مورد بررسی قرار گرفت . میکروسپورها در مرحله تک سلولی تا ابتدای دو سلولی از غنچه ها جدا شدند و در محیط کشت NLN-13 کشت گردیدند . میکروسپورها تحت تنش حرارتی (30 درجه سانتیگراد برای مدت 7-14 روز)، 4-D، ا2 (5-10 mg/l برای مدت 15-120 دقیقه) و تری فلورالین و اورایزلین (در غلظت 0/5-10 μM به مدت 42 ساعت ) قرار گرفتند . بعد از اعمال تنش کشتها به انکوباتور با دمای 25 درجه سانتیگراد و تاریکی تا مرحله تشکیل جنین انتقال یافتند . بعد از تولید جنین، جنین های تولید شده به محیط MS به همراه هورمون جیبریلیک اسید (0/01mg/l) برای باززایی منتقل شدند . نتایج نشان داد که تیمار حرارتی 30 درجه سانتیگراد به مدت 10-14 روز (بسته به رقم ) بیشترین جنین زایی را به دنبال داشت . همچنین ا لقاء جنین _ زایی میکروسپور برای اولین بار با استفاده از تیمار شیمیایی تریفلورالین و اورایزلین (0/5 - 2 مایکرو مولار به مدت 42 ساعت )به جای شوک حرارتی گزارش می گردد . نتایج این آزمایش تاکنون نشان می دهد که درصد جنین _زایی در تیمارهای مورد اشاره قابل رقابت با شوک حرارتی بوده به علاوه انتظار می رود به دلیل خصوصیت ضد میکروتوبولی آنها درصد دابلدهاپلوئیدی خودبه خودی افزایش یابد.

Keywords:

کلزا , جنین زایی , میکروسپور , تنش های حرارتی و شیمیایی و دابل هاپلوئید