انتقال ژن به گندم (Triticum aestivum L.) با آگروباکتریوم و از طریق شاخه زایی مستقیم
Publish place: 04th National Biotechnology Congress of Iran
Publish Year: 1384
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 2,830
متن کامل این Paper منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل Paper (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
این Paper در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI04_235
تاریخ نمایه سازی: 30 دی 1386
Abstract:
به منظور بهینه سازی انتقال ژنبه گندم با استفاده از آکروباکتریوم واریته تجن به عنوان نماینده گندم ایرانی مورد ترارریزش قرار گرفت. برای انجام تراریزش از 3 نوع جداکشت جنین کامل بدون خراش، جنین کامل خراش یافته و جنین کاملی که 5 روز روی محیط کشت پیش کشت، کشت شده بود استفاده شد. جنین های کامل پس از ضدعفونی سطحی بذور تحت شرایط کاملاً استریل از بذور گندم جدا شدند. برای تراریزش از پلاسمید pCAMBIA 3301 حامل ژن گزارشگر gus و نشانگر قابل انتخاب bar که موجب ایجاد مقاومت در برابر علف کش فسفیتوتریسین می گردد استفاده شد. برای انجام تراریزش از سویه AGLO آگروباکتریوم استفاده گردید. به منظور بهینه سازی تراریزش گندم مهمترین عوامل مؤثر بر تراریزش گندم با آگروباکتریوم (نوع جداکشت، نوع کربوهیدرات مورد استفاده در محیط کشت تلقیح، استفاده از پلورونیک در دو سطح، استفاده از عصاره توتون، استفاده از نیروی خلأ و تراکم سلولهای باکتری در زمان انجام تلقیح) مورد بررسی قرار گرفتند. پس از آلوده کردن جداکشت ها با سوسپانسیون باکتری، جداکشت های آلوده شده به محیط کشت توام انتقال یافتند و پس از گذشت 3 روز به محیط کشت شاخه زایی حاوی 500 mg/l آنتی بیوتیک سفاتوکسیم جهت کنترل رشد باکتری انتقال پیدا کردند و پس از 1 هفته به محیط کشت انتخابی حاوی 5 mg/l علف کش فسفیتوتریسین و 250 mg/l سفاتوکسیم منتقل گردیدند. پس از 30 روز جنین های باز زا شده به محیط کشت ریشه زایی انتخابی انتقال یافتند. بیان ژن gus با استفاده از محلول رنگ آمیزی X-gluc در برگ گیاهچه های باز زا شده بررسی شد. ظهور نقاط آبی پراکنده بر روی برگ گیاهچه های باز زا شده نشاندهنده بیانگر تظاهر موقت ژن gus می باشد. تجزیه پی سی آر گیاهان تراریخنه احتمالی با آغازگرهای اختصاصی ژن gus نشان داد که حداقل یک نسخه از این ژن وارد ژنوم این گیاه شده است. در این تحقیق فراوانی تراریزش بر اساس درصد گیاهان مقاوم به علف کش محاسبه شد.
Keywords:
Authors
بهناز ساعتیان
کرج، دانشکده کشاورزی دانشگاه تهران، گروه زراعت و اصلاح نباتات
هوشنگ علیزاده
کرج، دانشکده کشاورزی دانشگاه تهران، گروه زراعت و اصلاح نباتات
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :