روش STE به عنوان روشی مناسب در تهیه DNA ژنومی از گیاه آزولا (Azolla Filiculoides) جهت مطالعات ژنتیکی

در این تحقیق جهت دستیابی به مواد ژنتیکی با کیفیت مطلوب برای مطالعات ژنتیکی در گیاه آزولا، از سه روش استخراج DNA ژنومی (دلاپورتا و همکاران CTAB و STE) در قالب طرح بلوکهای کامل تصادفی و در سه تکرار مختلف استفاده گردید. کیفیت سنجی ماده ژنومی استخراج گردیده با استفاده از روش الکتروفورز با ژل آگارز، اسپکتروفتومتری و روش واکنش زنجیرهای پلیمرار (PCR) انجام پذیرفت. نتایج حاصله از آزمون مقایسات میانگین بر پایه روش دانکن در سطح احتمال 0/05 با نرم افزار آماری R معنی دار بودن روش استخراج STE را تایید نمود. DNA استخراج شده از روشهای مورد مقایسه با استفاده از پرایمرهای نیمه تصادفی ISSR و همچنین نتایج توالی یابی حاصل از تکثیر ناحیه ژنی ITS تایید کننده کیفیت و غلظت مناسب DNA استخراج شده با روش مورد مطالعه STE نسبت به سایر روشها بود. غلظت DNA ژنومی حاصله از مقدار و حجم مشخص از بافت مورد استفاده به ترتیب برای روش دلاپورتا و همکاران STE و CTAB دارای بالاترین میزان بود. بدین ترتیب با توجه به نتایج حاصله در این پروژه روش STE بهینه شده به عنوان روش مناسب جهت دستیابی به DNA ژنومی با کیفیت و کمیت مطلوب برای انجام مطالعات ژنتیکی در گیاه آزولا معرفی میگردد.

Keywords:

آزولا , استخراج آزولا , استخراج , روش STE