بررسی خواص بیوسنسوری و فعالیت آنزیم لوسیفراز ویبریو های لومینسانس جدا شده از استخر پرورش میگوییدر ایران

جدایه های متعددی از نوع باکتری لومینسانس از استخر پرورش میگو در جنوب شرقی ایران جدا سازی گردید. به منظور شناسایی جدایه ها از ژن های srRNA, luxA 16 و toxR استفاده گردید. آنالیز داده ها نشان داد که از میان جدایه ها، سه سویه VLA, VLB, VLC با بیشترین نور لومینسانس دارای 99 % شباهت به گونه Vibrio harveyi هستند. از انجایی که کاربرد باکتری های لومینسانس در شناسایی حشره کش ها و علفکش ها ثابت شده است، در این مطالعه ابتدایا سویه های فوق در معرض سموم مختلف قرار گرفتند تا میزان بقای سلولی و تغییرات شدت نور لومینسانس آنها مورد بررسی قرار گیرد. مقادیر EC50 حشره کش ها و علف کش ها مورد سنجش قرار گرفت و نتایج نشان داد که از میان آنها ایتیون، امیتراز و فوزالون کمترین میزان EC50 را دارند. در بررسی سمیت مواد شیمیایی نیز فنول بیشترین اثر را بر کاهش شدت نور لومینسانس داشته و کمترین EC50 را به خود اختصاص داد. آنزیم لوسیفراز از سه سویه فوق با استفاده از ستون کروماتوگرافی Q sepharose استخراج گردید و وزن مولکولی آن با روش SDS page اندازه گیری گردید. نتایج نشان داد که وزن مولکولی آنزیم استخراج شده حدود 80000 دالتون است. فعالیت آنزیم استخراج شده با افزودن سوبسترا نیز مورد بررسی قرار گرفت. بیشترین تولید نور در غلظت mg/ml PdCl 1 و 2 mg/ml FMN , 1 mg/ml NaBH4, 10 μl/ml decanal 0.01 مشاهده شد. بررسی خواص بیوسنسوری آنزیم لوسیفراز تحت مطالعه است

Keywords:

بیوسنسور های لومینسانس , Vibrio harveyi , سنجش سمیت , استخراج پروتیین