افزایش ارتفاع و سطح برگ گیاهان تراریخت توتون بیان کننده ژن AtEXPA18 آرابیدوپسیس تالیانا

اکپنسین ها گروهی از پروتیینهای دیواره سلولیاند که بهواسطه تغییرات pH ،موجب بسط دیواره سلولی میشوند. این پروتیینها از طریق سست کردن پیوندهای هیدروژنی بین میکروفیبریلهای سلولز و پلیمر ماتریکس موجب تغییر شکل دیواره و رشد میشوند. در این تحقیق، یک ژن اختصاصی ریشه از گیاه آرابیدوپسیس به نام AtEXPA18 که بهطور مستقیم در شکلگیری ریشههای مویین موثر است، همچنین نقش آن در دیگر بخشهای گیاهی ثابت شده است، جداسازی و تحت کنترل پیشبرنده 35S CaMV و خاتمهدهنده NOS درون ناقل بیان گیاهی pBI121 همسانهسازی و در نهایت به آگروباکتری منتقل شد. سپس این ژن طی روش تراریختی برگی توتون، به این گیاه انتقال یافت. گیاهان حاصل از باززایی روی محیط انتخابی حاوی کانامایسین گزینش شدند. گیاهان بهدستآمده از این طریق در نهایت به گلخانه انتقال یافتند و پس از رشد کافی مورد آنالیز مولکولی و مورفولوژیکی قرار گرفتند. برای اثبات تراریختی گیاهان در سطح ژنوم، استخراج دیانای صورت گرفت و ژن AtEXPA18 با استفاده از آغازگرهای اختصاصی طراحی شده و از طریق واکنش زنجیرهای پلیمراز تکثیر شد. همچنین پس از استخراج RNA و ساخت cDNA ،نتایج آزمون PCR-RT ،رونویسی تراژن را در گیاهان تراریخت تایید کرد. بررسیهای مورفولوژیکی گیاهان تراریخت نشان داد که این گیاهان نسبت به گیاهان غیرتراریخت دارای اندامهای بزرگتر و حجیمتری هستند. برای مثال صفاتی همچون ارتفاع بوته و سطح برگها، در توتونهای تراریخت نسبت به گیاهان شاهد، برتری معنیداری داشتند. نتایج بهدستآمده بههمراه سایر نتایج، نقش ژن مذکور را در بسط و توسعه سلولی نشان میدهند و آن را بهعنوان تنظیمکننده رشد عمومی، برای بهدست آوردن گیاهان تراریخته با اندام بزرگتر توصیه میکنند.

Keywords:

اکسپنسین , اگروباکتریومتومفشینس , بسط دیواره سلولی , تراریختی