تثبیت آنزیم اینولیناز روی نانوذرات مغناطیسی پپتیدی و پروتیینی جهت تولید شربت پر فروکتوز

آنزیم اینولیناز قادر به تولید شربت پرفروکتوز در یک فرایند تک مرحلهای آنزیمی از اینولین میباشد. در این پژوهش در ابتدا نانوذرات مغناطیسی به روش هم رسوبی تهیه گردید. پس از آن در مرحله دوم، نانوذرات ایزوله پروتیین سویا به همراه سرمآلبومین گاوی (نانوذرات پروتیینی) و نانوپپتیدهای حاصل از هیدرولیز آنزیمی گلوتن گندم با آنزیم های اندو پپتیداز، به روش حلال زدایی تهیه و سپس جهت اصلاح سطح و پایدار سازی نانوذرات مغناطیسی، فرآیند پوشش دهی سطح انجام گرفت. درمرحله سوم، فرآیند تثبیت آنزیم بر روی سطوح بستر مغناطیسی با استفاده از گلوترآلدهید صورت گرفت. در این تحقیق به منظور مطالعه شکل و ساختار، اندازه و ویژگی های عملکردی نانوذرات مغناطیسی و پروتیینی و فرآیند تثبیت آنزیم در کلیه مراحل تهیه، روش های تشخیص میکروسکپ الکترونی روبشی (SEM (وتفرق دینامیک نور (DLS (بهکار گرفته شد. پس ازتثبیت آنزیم، ویژگیهای آنزیم تثبیت شده بررسی و با ویژگیهای آنزیم آزاد مورد مقایسه قرار گرفت. نتایج نشان داد که، مقاومت حرارتی آنزیم، همچنین پایداری در pH اسیدی بهبود یافته است. میزان فعالیت آنزیم، تعداد سیکلهای استفاده مجدد از آنزیم، همچنین پارامترهای سینتیکی (2/t1, Km, Vmax (آنزیم تثبیت شده در مقایسه با آنزیم آزاد به صورتی تغییر یافته که نشان دهنده افزایش پایداری و بهبود عملکرد آنزیم پس از تثبیت میباشد.

Keywords:

تثبیت اینولیناز , نانوپپتیدها , نانوذرات مغناطیسی , ایزوله پروتیین سویا , هیدرولیزات گلوتن گندم